Attore come il padre, Guillaume Depardieu aveva cominciato a recitare giovanissimo, ma presto la sua carriera si era scontrata con la sua instabilità: a soli 17 anni viene arrestato per possesso di eroina, a 32 anni passa nove mesi in prigione per aver malmenato un suo ammiratore.

Nonostante l’ ingombrante cognome, Guillaume riesce a rivelare interessanti doti d’attore e a vincere il premio Cesar nel 1996 per il suo ruolo in Les apprentis di Pierre Salvadori.

Interprete di una ventina di film, la sua presenza è da ricordare soprattutto per i lungometraggi  Tutte le mattine del mondo (1991) di Alain Corneau (opera in cui recita accanto al padre), Pola X (1999) di Leos Carax e La duchessa di Langeais (2007) di Jacques Rivette (m.m)